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能否保留更多的miRNA是关键

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浏览:- 发布日期:2016-12-28 13:21:47【

目前miRNA研究中最令人兴奋的领域之一就是对血清或血浆样本中存在的miRNA进行检测。在血清和血浆中存在的相对稳定的胞外miRNA引起了极大兴趣,因为miRNA水平变化可作为潜在的多种疾病的无创性生物标志物。通过从血清或血浆纯化RNA,发现某些癌症出现几种miRNAs的独特表达。

为了确保后期数据的可靠性,提取核酸的质量就尤为重要。尤其是针对血清血浆体液等特殊样品。血清和血浆中的RNA通常由小于100个核苷酸的分子组成。

miRNeasy Serum/Plasma Kit可从小体积血浆或血清中纯化RNA。

整合了基于苯酚/胍的样本裂解方法和基于硅胶膜的总RNA纯化方法。试剂盒中包括的QIAzol Lysis Reagent是苯酚和异硫氰酸胍的单相溶液,便于裂解组织,抑制RNases,并去除大部分有机抽提裂解液中的胞内DNA和蛋白。

可从至多200 µl血清或血浆中有效纯化RNA。miRNeasy Kits制备的RNA纯度高,可直接用于敏感的下游应用。miRNeasy操作流程将盐或苯酚污染的可能性降到最低,这些污染可能影响后续分析。

血清和血浆样本溶于QIAzol Lysis Reagent中。加入氯仿后,裂解液离心后分成水相和有机相。RNA位于上层水相,DNA位于中间相,蛋白位于下层有机相或中间相。

提取上层水相后,加入乙醇以提供RNA结合的合适条件,RNA分子大于18个核苷酸。样品再加入RNeasy MinElute离心柱,总RNA结合到膜上,苯酚和其他污染物被有效洗去。高品质RNA在小体积不含RNase水中洗脱。

血清和血浆中主要含有小RNAs,因此无需分开纯化小RNA和大RNA组分

miRNeasy Serum/Plasma Kit可纯化包括miRNA的总RNA,用于多种应用,包括:

生物标志物研究

Northern印迹分析

使用mi PCR System进行定量real-time RT-PCR

微阵列分析

说到这里大家应该已经很清楚了,只要把血清血浆等特殊体液样品交给我们欧易生物。我们肯定会使用最优的试剂盒,最好的技术服务,得到优质可靠的数据。

在这小编也提醒一下大家,制备血清血浆时要做到:

迅速无酶,低温保存。

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    【本文标签】:miRNA
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