cDNA 文库构建(质粒文库或噬菌体文库)
采用 Clontech 公司 Smart cDNA Library Construction Kit 建库。
交货内容: A. 产物电泳图谱; B. 初始库,保存在- 20 0 C ; C. 文库评价数据,包括库容量,插入片段平均长度,重组效率 , cDNA 完整性评价等。 具体指标:初始基因文库库容量 1 × 10 6 pfu 以上,如需扩增,扩增后容量 1 × 10 9 pfu 以上;插入片段平均长度 1.0~1.5kb( 非常规物种不承诺 ) ;重组效率大于 90 %(质粒文库) , 大于 70%( 噬菌体文库 ) ; cDNA 的完整性,读框完整比例 ≥30% 【仅对长度为 3 kb 以下的基因而言】。 成功案例:已经成功构建及在建的文库包含人,大鼠,小鼠,棉花,水稻,拟南芥,鱼类,百合,土豆 ….. 等十几个物种,建库质量高,稳定性好。对于未能达到指标的文库免费重建直至成功。 注意事项:样品需求量:组织( 2 ~ 3 克),细胞( 10 8 ) , 总 RNA(200ug) , mRNA(5 ~ 10ug) ,请务必保持样品新鲜, RNA 无任何降解,以确保文库质量,请尽量提供物种基因组背景资料信息,如:基因组大小,基因平均长度等等。 |