概念： 即：使用 DNA 或者 RNA 探针来检测与其互补的另一条链在 细菌 或其他真核

细胞 中的位置。分为菌落原位杂交和组织原位杂交。

组织原位杂交： 简称原位杂交，指组织或细胞的原位杂交，它与菌落的原位杂交不同

。菌落原位杂交需裂解细菌释出 DNA ，然后进行杂交。而原位杂交是经适当处理后，

使细胞通透性增加，让探针进入细胞内与 DNA 或 RNA 杂交。因此原位杂交可以确定

探针的互补序列在胞内的空间位置。

探针： 用于原位杂交的探针可以是单链或双链 DNA ，也可以是 RNA 探针。通常探针

的长度以 100 ～ 400nt 为宜，过长则杂交效率减低。最近研究结果表明，寡核苷酸

探针（ 16 ～ 30nt ）能自由出入细菌和组织细胞壁，杂交效率明显高于长探针。因

此，寡核苷酸探针和不对称 PCR 标记的小 DNA 探针或体外转录标记的 RNA 探针是组

织原位杂交的优选探针。

标记： 探针的标记物可以是放射性同位素（如 3H 、 35S 、 32P ），也可以是非放

射性生物素和半抗原等（荧光素，生物素、地高辛等）。

应用： 此方法有很高的敏感性和特异性，可进一步从分子水来探讨细胞的功能表达及

其调节机制。已成为当今细胞生物学、分子生物学研究的重要手段。例如，对致密染色

体 DNA 的原位杂交可用于显示特定的序列的位置；对分裂期间核 DNA 的杂交可研究

特定序列在染色质内的功能排布；与细胞 RNA 的杂交可精确分析任何一种 RNA 在细

胞中和组织中的分布。此外，原位杂交还是显示细胞亚群分布和动向及病原微生物存在

方式和部位的一种重要技术。