SEARCH
技术服务021-34781616

热门搜索关键词:转录组基因组甲基化酵母文库蛋白芯片

021-34781616

当前位置首页 » 新闻资讯 » 技术&解读&应用 » 欧易客户发现miRNA调控心脏纤维化的新机制

欧易客户发现miRNA调控心脏纤维化的新机制

返回列表 来源: 查看手机网址
扫一扫!欧易客户发现miRNA调控心脏纤维化的新机制扫一扫!
浏览:- 发布日期:2016-10-09 16:08:51【

上海大学再生与衰老实验室肖俊杰副教授团队发现调控心脏纤维化的新机制,miRNA-433通过AZIN1 和JNK1两个基因导致Smad3激活,影响心脏纤维化,文章发表在Theranostics(IF 8.854)。其中的miRNA芯片筛选工作由欧易生物完成。

众所周知,纤维化是一种病理心脏肥大的标志,进而发展为心肌病和明显的心脏衰竭。微小RNA是内源的非编码的单链小RNA,一般为19-22个核苷酸,它可以通过促进目的mRNA的降解以及抑制mRNA的转录来调节基因的表达。微小RNA在许多生物过程及其调节多种心血管疾病包括纤维化。

作者先是对心肌梗死后3周的小鼠心脏与假手术的小鼠心脏进行了miRNA基因芯片筛选,最终锁定了miRNA-433对心脏纤维化的调控作用。作者随后在3个动物模型中(心梗3周/Dox诱导的心肌病/DCM患者)验证了miRNA-433表达量均上调,另外,细胞的纤维化模型中于此结果一致。

图1:miR-433在心脏纤维化中显著上调

由于miRNA-433在纤维化中表达量丰富,所以作者抑制了miRNA-433的表达,观察其功能。分别通过尾静脉注射了miR-433的拮抗剂(antagomir)和抑制病毒(AAV-9),结果发现降低miRNA-433的表达能够减弱心脏纤维化并且改善心功能。

图2 拮抗剂/AAV-9病毒降低miRNA-433能够减弱心脏纤维化改善心功能

基于降低miRNA-433能够减弱心脏纤维化改善心功能,作者猜想miRNA-433很可能对细胞增殖和分化产生影响。作者分别在体内和体外采用免疫荧光染色技术在检测了抑制了miRNA-433表达后,细胞的增殖与分化。结果发现无论在体内还是体外,降低miR-433表达都能抑制纤维细胞的增殖及分化。

图3 降低miR-433抑制纤维细胞的增殖及分化(体内+体外)

与此同时,作者又过表达了miR-433,在体外采用免疫荧光染色技术在检测了过表达miRNA-433表达后,细胞的增殖与分化。结果发现过表达miR-433表达促进纤维细胞的增殖及分化。

图4 过表达miR-433促进纤维细胞的增殖及分化(体外)

当确定了miR-433的生物学效应后,作者探寻了miR-433的下游作用靶点以及影响的信号通路。作者采用生物学信息分析,发现miR-433直接作用于AZIN1和JNK1。作者分别对这两个作用靶点进行了研究,通过荧光素酶、免疫荧光以及western blot 实验探究出miR-433通过作用于AZIN1,进而激活TGF-β/Smad3信号通路调节心脏纤维化。同时,作者找寻了JNK1的作用机制,通过一系列实验作者发现JNK1能够导致ERK和p38激酶激活,使得Smad3激活最终导致心肌纤维化。

上海大学再生与衰老课题组,肖俊杰副教授团队确定了miRNA-433在体外和体内通过AZIN1 和JNK1两个基因导致Smad3激活,进而影响纤维化。由此,可能是为改善心脏纤维化的治疗提供了一个新的策略。

参考文献:

Tao L, Bei Y, Chen P, Lei Z, Fu S, Zhang H, Xu J, Che L,Chen X, Sluijter JP, Das S, Cretoiu D, Xu B, Zhong J, Xiao J, Li X. CrucialRole of miR-433 in Regulating Cardiac Fibrosis. Theranostics 2016;6(12):2068-2083

推荐阅读

    【本文标签】:RNA miRNA miRNA调控 心脏 心脏纤维化 机制 分子生物学
    【责任编辑】:欧易生物版权所有:https://www.oebiotech.com转载请注明出处

    欧易生物

    技术热线:021-34781616 咨询热线:4006-4008-26

    上海市闵行区新骏环路138号5幢3层
    service@oebiotech.com
    欧易生物
    欧易生物微信公众号
    沪ICP备-050455 网站地图  Copyright © 2016 上海欧易生物医学科技有限公司 保留所有权利