高通量单细胞技术的确是一个具有划时代意义的技术。利用该技术，全球的科研人员从“异质性”的角度在不同研究领域进行深入挖掘，获得众多令人兴奋的新发现。关于高通量单细胞技术的发文情况，大致可以划分为两个阶段：

2015-2017年期间，是高通量单细胞发文的“黄金期”。此时，由于高通量单细胞技术尚未完全成熟，技术复杂程度较高，仅掌握在部分顶尖实验室，该阶段的研究主要是构建不同组织的单细胞图谱框架，且大多发表于CNS系列期刊，着实令人“眼红”。

自2018年起，10x Genomics和BD等公司的成熟化解决方案成功打破技术壁垒，高通量单细胞技术这个“旧时堂前燕”;开始“飞入”越来越多的实验室中。从此，高通量单细胞技术的应用普及程度大幅提升，利用相关技术的研究论文发表也进入井喷期。

10x Genomics发文统计

随着高通量单细胞相关文章发表数目的增加，那个“仅通过一两个样本，简单构建某个组织细胞图谱就能发高分文章”的技术红利时代，已经一去不复返了。这一点，想必各位深有体会。

接下来，我们来盘点一下，那些在“单细胞发文井喷”时代（2018年-今），仍然能够在CNS期刊上发表的高通量单细胞文章的三大特点：


 

2021年，Cell上发表了题为“A Pan-Cancer Single-Cell Transcriptional Atlas of Tumor Infiltrating Myeloid Cells”的研究论文。该研究在单细胞水平对210个病人、15个癌种内肿瘤浸润髓系细胞进行了系统性的刻画，比较了肥大细胞、树突状细胞以及肿瘤相关巨噬细胞在不同癌种内的特性，为靶向不同癌种内髓系细胞的免疫治疗提供了重要依据。

2020年，Cell首次报道非人灵长类器官衰老的高精度单细胞转录组图谱研究，揭示了细胞类型特异性的氧化还原调控的失稳是包括人类在内的灵长类卵巢衰老的共性分子机制。

2019年，Cell上发表的一篇研究论文揭示了溃疡性结肠炎（UC）的耐药机制。研究人员发现在UC患者中，肿瘤坏死因子(TNF)蛋白水平较高，抗TNF药物可减轻炎症并治愈许多患者的组织。研究人员进一步利用RNAscope原位杂交结合免疫荧光验证从空间定位上展现了单细胞测序的主要发现，例如下图为利用RNAscope原位杂交技术检测了健康组织与炎症组织中的炎症相关成纤维细胞的特征基因表达。
 

科研人员大多希望能够在CNS上发表自己的研究结果，但是想要走“大样本量构建精细化细胞图谱”的途径不太现实，“大样本”所需要的经费不是所有人可以承受的；而“特殊样本”的方案属于可遇不可求，科学研究不是一朝一夕的事情，并非随便换个模型就能有突破性进展。因此，对于大多数科研人员而言，在自己感兴趣的领域中进行深耕，获得重大性突破，并严格验证相关结果，可能是明智的选择（“科研，有时就是水磨的，急不来”——想起我导师的口头禅）。

这时，需要大家注意，想要发表CNS，验证方案的严格性是十分重要的。否则，再有意义的发现，也无法经得起审稿人的质疑。

通过scRNA-seq获得高通量的单细胞转录组数据后，利用原位组织学验证是目前流行的研究策略，也是对单细胞测序结果筛选出的有价值分子的空间分布定位回溯以及结果真实性的验证。

但是常规的原位组织验证具有很多缺陷——由于这其中的很多原位待检测分子属于新发现的靶点，缺乏有效的免疫组化抗体；也存在一些例如GPCR、离子通道这类无法制备免疫组化抗体的靶点；而对于分泌型细胞因子由于其合成后被第一时间排出到细胞外，故无法通过免疫组化方式定位分泌细胞；包括长链非编码RNA在内的一些靶点则不可能使用免疫组化的原位检测方法进行靶点追踪。而RNAscope技术以其高度敏感性和特异性、单分子可视化、多通道靶点同时检测等特有的优势，已经广泛应用于原位验证单细胞转录组学的结果。（上海欧易可以提供RNAscope全链条服务）

RNAscope技术是由Bio-Techne旗下Advanced Cell Diagnostics (ACD)公司研发的RNA原位杂交产品，在近年来的生物检测领域发展迅速。与传统的RNA原位杂交相比，RNAscope技术属于新一代RNA原位杂交技术，其特异性的双Z探针设计避免了传统长链RNA探针的弊端，配以自身级联放大检测原理，可以高效敏感地检测到目标RNA。

欧易生物于2018年成立单细胞事业部，目前已经协助客户发表单细胞文章19篇。欧易生物现已引进RNAscope技术全套设备和试剂，搭建完整的服务体系。欧易生物致力协助各位科研工作者登顶学术高峰。