动物组织细胞核制备试剂盒

产品概述

“单细胞核测序用动物组织细胞核制备试剂盒（25 rnx）”可用于人类、大小鼠等多种动物组织的细胞核制备。

本产品可以处理众多类型的组织样本，并且已经预先配置好高质量的酶溶液，不仅使用方便，还可以得到高活性、高得率的动物细胞核悬液。

本产品的组分都经过严格的质量控制和功能验证，在最大程度上保证动物细胞核悬液的有效制备的同时，也能保持实验数据的准确性和可靠性，以应用于下游的scRNA-seq（Single-Cell RNA sequencing）实验。

产品组成

适用范围

本产品适用于人类、大鼠、小鼠等多种动物组织的细胞核制备。经本公司长期验证，适用的组织类型包括：心脏、肝脏。

保存运输

本试剂盒所有试剂均需要在-20℃环境下保存，干冰运输。

操作步骤

详细参考步骤请参考试剂盒说明书。

→点击说明书 _ 单细胞测序用动物组织细胞核制备试剂盒.pdf下载

注意事项

1. 本试剂盒仅适用于科研，不适用于临床检测。

2. 尽量避免试剂的反复冻融，建议到货后分装保存。

3. 为避免交叉污染，处理不同样品时请更换剪刀，吸取不同样品时请更换枪头。

动物组织解离试剂盒

产品概述

“动物组织解离试剂盒（10 rxn）”可用于人类、大鼠、小鼠等多种动物组织的细胞悬液制备。

本产品适用于温和、高效的处理众多类型的组织样本，并且已经预先配置好高质量的酶溶液，不仅使用方便，还可以得到高活性、高得率的单细胞悬液。

本产品的组分都经过严格的质量控制和功能验证，在最大程度上保证单细胞悬液的有效制备的同时，也能保持实验数据的准确性和可靠性，以应用于下游的scRNA-seq（Single-Cell RNA sequencing）实验。

产品组分

本试剂盒（10 rxn）包含四种成份，如下表所示：

*胶原酶I含有比较均匀的各种酶活力，通常用作上皮细胞，肝，肺，脂肪和肾上腺组织细胞的制备；胶原酶II含有更高的梭菌蛋白酶活性，通常用于心脏，骨，肌肉，胸腺和软骨等组织来源细胞的制备；胰酶适用于一些软组织，但单独的胰蛋白酶通常对组织解离无效，在组织解离的时候，胰蛋白酶常需要与其他酶联合使用。

适用范围

本产品适用于人类、大鼠、小鼠等多种动物组织的细胞悬液制备。

经本公司长期验证，适用的组织类型包括：心脏、乳腺、生殖器官肿瘤（如卵巢癌、前列腺癌）、内脏肿瘤（如肺癌、胰腺癌、肾癌、肝癌等）、头颈部（如鼻咽癌、扁桃体、髓母细胞瘤等）等多类组织。

保存运输

酶解液必须在-20℃保存，培养基4℃保存，干冰运输。

操作步骤

详细参考步骤请参考试剂盒说明书。

→点击  说明书-单细胞测序用动物组织解离试剂盒.pdf 下载

注意事项

1. 本试剂盒仅适用于科研，不适用于临床检测。

2. 尽量避免试剂的反复冻融，建议到货后分装保存。

3. 使用前请将试剂盒各组分置于室温解冻，解冻后上下颠倒数次充分混匀后使用。

4. 为避免交叉污染，处理不同样品时请更换剪刀；吸取不同样品时请更换枪头。

动物组织低温解离试剂盒

产品概述

“动物组织低温解离试剂盒（6 rxn）”可用于人类、大鼠、小鼠等多种动物组织的细胞悬液制备。 目前市场中多数动物组织解离试剂盒的适用温度为37 ℃，但有文献报道细胞在37 ℃下具有较高的代谢活性，在其解离过程中将不可避免的引发大量应激基因的高水平表达。本试剂盒含有低温活性蛋白水解酶，这是一种丝氨酸内蛋白酶，对天然和变性蛋白具有广泛的特异性，可在低温环境下解离制备单细胞悬液，能够有效的降低应激基因的表达以提高数据结果的准确性和可靠性。

本产品已经预先配置好高质量的酶溶液，不仅使用方便，还可以得到高活性、高得率的单细胞悬液。本产品的组分都经过严格的质量控制和功能验证，在最大程度上保证单细胞悬液的有效制备的同时，也能保持试验数据的准确性和可靠性，以应用于下游的scRNA-seq（Single-Cell RNA sequencing）实验。

产品组分

本试剂盒（6 rxn）包含四种成份，如下表所示：

适用范围

本产品适用于人、大小鼠等多种动物常规组织的单细胞悬液制备。

仅本公司长期验证，适用的组织类型包括：人-肺、人-肠腹膜、小鼠-宫颈肿瘤等。

自备材料

1. 带有能容纳15mL离心管的水平转子的离心机；
2. (低温)恒温混匀仪；
3. 滤网：孔径40μm；
4. EP管：15mL 、50mL；
5. 一次性滴管、无菌剪刀等。

操作步骤

1. 将Enzyme 1、Buffer 1、Buffer 2和Buffer 3提前放置于4℃环境中进行解冻。
2. 取出待处理的组织样本，若是含有保护液的组织则直接置于培养皿中弃去保护液；若是含有冻存液的组织，则先将样本置于37 ℃水浴中2 min后，再弃去冻存液；然后使用DPBS对组织进行洗涤，清除残余的血液等。

*以上均在冰上操作。

3. 经1、2步骤处理过的组织转移至干净的培养皿中，加200 ul的Buffer 2（使组织始终保持湿润状态），用无菌剪刀将组织尽量剪碎至乳糜状。
4. 将乳糜状的组织转移至15mL的EP管中，用移液器吸取400 ul的Buffer 2冲洗培养皿，并将液体转移至15mL的EP管中。
5. 重复步骤4。
6. 在15mL的EP管中加入960ul的Enzyme 1、40ul的Buffer 1和10μL的Buffer 3，用移液器充分吹打混匀后，将此EP管置于6℃恒温混匀仪上，消化30min后进行镜检。

*若细胞总量较少，可适当延长消化时间。

7. 将40μm筛网组装到50mL的EP管上。先加入5mL的DPBS（含1% BSA），用一次性胶管反复吹打混匀，静置5min，待组织沉淀沉于底部，使用1mL移液器吸取上部悬液，滴加到筛网上，使其缓慢过滤。
8. 重复步骤7，将最后得到的约10mL体系转移至15mL的EP管后，500×g、4℃离心10min。
9. 离心结束后，小心吸出全部上清液（尽量不要有残余），然后用500μl的DPBS（含1%BSA）重悬镜检。

*若发现重悬液中存在红细胞或死细胞，采用红细胞裂解液或密度梯度离心法去除。

详细参考步骤请参考试剂盒说明书。

→点击 说明书 ~ 单细胞测序用动物组织低温解离试剂盒.pdf 下载

注意事项

1. 本试剂盒仅适用于科研，不适用于临床检测。
2. 尽量避免试剂的反复冻融，建议到货后分装保存。
3. 整个操作步骤全程冰上进行。
4. 50 mL离心管埋于冰中，将筛网置于管口，过滤时可将筛网稍稍倾斜15°~30°，以避免堵塞。针对组织消化液粘稠的样品，可划动或加预冷培养基反复稀释吹打后，进行两次过筛处理，注意第二次过筛需要缓慢滴加过滤，不能吹打或划动筛网。
5. 离心后，离心管轻拿轻放，不要扰动细胞沉淀。最后管底剩余的少量上清可使用10 μl量程的移液器进行吸取，注意不要接触到沉淀。
*考虑到样本、设备等因素的影响，可适当增大动物组织低温解离的酶解体系并提高其浓度。