项目案例（酵母双杂交-膜体系）
Integration of ovular signals and exocytosis of a Ca2+ channel by MLOs in pollen tube guidance
花粉管定向生长的机制研究
发表期刊：Nature Plants | 影响因子：13.297
应用介绍
花粉管为什么能准确的朝向胚珠生长？7次跨膜蛋白MLO，在花粉管中富集表达，会不会与花粉管定向生长有关呢？本研究以MLO5为诱饵，通过膜体系酵母双杂交筛选验证发现， MLO5与 VAMP721、VAMP722 结合以靶向调控CNGC18 在质膜上的定位，进而影响花粉管转向时局部胞质内Ca2+浓度，控制花粉管向胚囊定向生长。
图 | MLO5 and MLO9 interact with VAMP721 and VAMP722 through the longin domain, but not with VAMP711 in yeast. Lower: the membrane topology of VAMP721 and VAMP722 on vesicles.
图 | Image of yeast two-hybrid screen showing the interaction between MLO5, MLO9 and CNGC18. Cub, C-terminal half of ubiquitin; Nub, N-terminal half of ubiqutin; NubG, negative control with a point mutation in Nub; NubI, positive control. –LWHA, media lacking Leu, Trp, His and adenine; –LW, media lacking Leu and Trp.
主要结果
本研究了确定了MLO蛋白在介导胚囊信号识别和Ca2+之间的关系，和对花粉管导向的控制作用，对花粉管定向生长的深入研究具有重要意义。
