CUT&Tag测序
CUT&Tag(Cleavage Under Targets and Tagmentation),即靶向剪切及转座酶技术,是一种利用酶锚定技术进行高效、高分辨率的DNA测序文库构建方法,同时是一种新的DNA-蛋白质互作研究方法,可用于检测组蛋白、RNApolymeraseII和转录因子等具有DNA结合功能的蛋白种类,揭示更多染色质在调控基因表达方面的重要作用,有助于分析细胞量少的样本的特定染色质特征,进一步了解基因调控。
技术原理
CUT&Tag使用的ChiTag是ProteinA蛋白与Tn5转座酶的融合蛋白,ProteinA蛋白可在细胞内直接结合抗体(抗体结合在目的蛋白上),连带的Tn5转座酶将切割目的蛋白附近的DNA序列,并将DNA片段连上测序用接头,并释放到细胞外。由于绝大部分无关的染色质还留在细胞核内,因此整个实验的信噪比大幅提高,同时简化了实验步骤,PCR之后可直接用于高通量测序。
细胞+刀豆蛋白A→孵育→目标蛋白一抗孵育→二抗孵育→加入转座体ChiTag(ProteinA-Tn5转座酶)→Mg2+激活反应→DNA提取→PCR扩增→测序
产品优势
与ChIP-Seq相比无需甲醛交联和免疫共沉淀步骤,省时高效
所需的细胞量少
背景信号低,可重复性好等
品牌优势
硬数据,好服务
坚持使用原装试剂盒,坚持数据真实
实验经验丰富,单细胞解离的上万例组织解离+裂核经验,可应用于CUT&Tag实验中
售后一对一人工服务对接,坚持以解决问题为导向
已助力客户发表高水平文章3000+篇,其中CNS文章6篇
组学技术全面,灵活多组学服务分析,将文章档次提升新台阶
生信分析
样本要求
1. 组织样本:500mg(新鲜组织4℃运输、或冰冻样本-80℃保存运输)以解离后可达到105个数为准
2. 细胞样本:105个,90%以上活性。可提供梯度冻存样本(需提供冻存前细胞个数及活性)
3. 物种:有参考基因组且有基因组注释文件的物种
4. 抗体:
1) CUT&Tag实验的抗体(一抗)需要客户提供
2)抗体用于CUT&Tag实验前需进行Westernblotting杂交验证,条带单一且大小符合预期,客户需提供结果图片
3)抗体不得稀释,不得反复冻融,建议送原管抗体