近日，陆军军医大学西南医院柴进教授为通讯作者，在国际经典医学综合期刊 EMBO Molecular Medicine (IF: 12.137) 在线发表了题为“A homozygous R148W mutation in Semaphorin 7A causes progressive familial intrahepatic cholestasis”的研究论文，首次在临床发现并确诊了世界首例由 SEMA7A^R145W 纯合子突变所导致的家族遗传性肝内胆汁淤积性肝病（PFIC），并初步阐明了其发病机制和治疗方案。

西南医院潘琼副研究员、博士后罗刚、瞿家权、儿科陈盛主任为共同第一作者。欧易生物在本研究中承担全基因组重测序和分析工作。

肝内胆汁淤积，会导致肝脏损伤。胆汁淤积有多种成因，包括遗传性和获得性胆汁形成障碍。目前已报道多个家族遗传性肝内胆汁淤积（PIFC）基因。

Semaphorins 通过其膜受体介导细胞外信号，有助于组织形态发生和稳态维持。Semaphorin 7A (SEMA7A) 是唯一与糖磷脂酰肌醇有关的膜结合信号，它可以在多种组织中表达，参与多种生物学过程。有关 SEMA7A 在肝脏疾病中的作用尚未见报道。

图 1 | sema7a 中一个罕见的 p.R148W 纯合突变新病例的鉴定

本研究从临床发现一患儿（图 A 的 IV.4）呈现不明原因高胆汁酸血症伴有明显肝功能损害的表型，经筛查其影像、生化、自身抗体等各项指标后，排除了目前已知的肝病，初步考虑为未知的遗传性胆汁淤积肝病。

利用全基因组重测序（WGS）联合生物信息学技术对患者及其家系成员进行分析，结果显示已知的 PIFC 基因内均未检测到突变。在 NTCP/SLC10A1 基因内发现一个 p.S267F 纯合子突变。NTCP 是肝细胞基底外侧膜胆汁酸摄取转运体，其功能缺失突变 (p.R252H) 可导致无肝损伤的高胆血症。但 Slc10a1^S267F 纯合突变小鼠未表现出肝损伤和高胆血症症，表明患儿肝功能异常可能另有原因。

进一步对 WGS 数据进行分析，在 SEMA7A 基因中鉴定到一个纯合的错义突变 c.C442T（p.R148W）。蛋白质结构预测表明，R148W 会改变 SEMA7A 蛋白局部构象，进而可能影响其功能。

Sema7a^R145W 纯合突变小鼠表现出明显的肝脏损伤。对小鼠肝脏进行 LC-MS 代谢物检测，结果显示肝脏中出现明显胆汁酸排泄受阻的迹象。

转录组分析表明，小鼠肝脏中胆汁酸合成基因表达降低、胆汁酸外排转运基因表达升高。特别值得注意的是，Sema7a^R145W纯合突变小鼠肝脏 Bsep 和 Mrp2 蛋白水平下降明显，但其 mRNA 水平未有明显变化。转染 SEMA7A_R148W 后，原代培养的小鼠肝细胞中 Bsep 和 Mrp2 蛋白水平也出现了降低。

图 2 | Sema7 的 R145W 突变显著降低肝细胞小管膜胆汁酸 (BA) 外排转运体、Bsep 和 mrp2 的水平

给予患儿 UDCA (13 mg/kg/天) 和 GSH (40 mg/kg/天) 作为经验治疗。本研究数据显示，UDCA 和 GSH 治疗可显著改善这种新型 PFIC 患者的异常肝功能。

本研究鉴定了一个新的与 PFIC 相关的遗传位点，为胆汁淤积肝病的临床诊断提供了新证据，同时本研究也为该病的临床诊治提供了依据。

原文链接：https://doi.org/10.15252/emmm.202114563