肝癌，尤其是肝细胞癌，素来有“沉默杀手”之称，多数患者一发现便是晚期，治疗选择有限。但您可能从未想过，在我们与癌症斗争的战场上，一群意想不到的“微观盟友”正潜伏在肿瘤内部。
今年7月，一项发表在权威肝病期刊《JHEP Reports》上的研究，为我们揭开了肝癌肿瘤内部一个隐秘的世界——肿瘤内微生物组，并从中发现了一位潜在的“抗癌战士”：Ralstonia菌。
一、肿瘤不是无菌的，里面住着一个“微生物社会”
我们都知道肠道里有菌群，但科学家们发现，肿瘤组织也并非无菌的“荒地”，而是存在着一个复杂的“微生物社会”。
这项研究应用2bRAD-M微生物测序技术（欧易生物提供），对113例人体组织样本进行精密测序后，绘制出肝癌的微生物图谱，发现：
肿瘤里的微生物会“拉帮结派”：根据主导菌群的不同，肝癌可分为两种亚型：
RT型（Ralstonia主导型）：由潜在的“好细菌”Ralstonia主导。
nRT型（非Ralstonia主导型）：由其他如克雷伯菌等细菌主导。
好细菌在退化：与正常组织相比，肿瘤组织中的微生物多样性显著降低，其中Ralstonia的含量更是明显减少。
这提示我们，肿瘤的发生和发展，可能伴随着内部微生物生态的“失衡”。
（肿瘤内微生物群落组成及病理组间丰度差异。(A)条形图展示通过LEfSe分析（结合Kruskal-Wallis和Wilcoxon秩和检验与线性判别分析）识别的优势菌种 LDA 评分。紫色、绿色和橙色条形分别表示在T组（肿瘤）、NA组（邻近正常组织）和N组（正常组织）中相对丰度较高的菌种。(B)随机森林分析评估了三组间相对丰度存在显著差异的前10种菌种。(C)热图呈现了区分三组的关键细菌菌种平均丰度分布。(D)桑基图展示了正常对照组（N组）向 HCC 病例（T组和NA组）转移的细菌分类群流动路径及相对比例。(E)Ralstonia属菌种相对丰度特征。(F)通过qPCR分析从T组和N组随机选取的组织样本（每组n=6）验证了Ralstonia属菌种的丰度。统计学差异通过独立样本t检验进行评估。）
二、谁是Ralstonia？它为何是“好人”？
Ralstonia并非外来客，它本就存在于我们的人体环境中。在这项研究中，它展现出了诸多“正义”的特性：
它多在健康组织中：在正常肝组织和癌旁组织中，它的含量远高于肿瘤核心区域。
它与病情较轻相关：它的丰度与较低的肿瘤标志物CA199水平、更轻的肝硬化程度显著负相关。
这些线索都指向一个可能性：Ralstonia可能是一个不利于肿瘤生长的“抑制者”。
三、实验室验证：它不仅在场，更在“战斗”
光有关联性还不够，科学家们必须用实验证明它的能力。
体外细胞实验：
抑制增殖：将Ralstonia与肝癌细胞共同培养，能显著抑制癌细胞活力，减少细胞克隆形成。
阻止扩散：Transwell实验表明，它能有效降低癌细胞的迁移和侵袭能力。
促进凋亡：它能诱导癌细胞走向程序性死亡。
动物体内实验：
抑制肿瘤：将活菌直接注射到小鼠的肿瘤内，可以明显抑制肿瘤生长，且效果优于另一种常用的益生菌。
安全性高：在整个治疗过程中，小鼠的体重及肝肾功能指标均未出现异常，显示出良好的安全性。
（体外和体内实验均证实Ralstonia sp.对 HCC 细胞具有抑制作用。(A) CCK -8实验显示Huh-7和Hepa1-6细胞与Ralstonia sp.共培养48小时后的存活率（每组5孔）。(B) HCC 细胞共培养48小时后的克隆形成实验（每组3孔）。(C)评估 HCC 细胞与Ralstonia sp.共培养48小时后迁移和侵袭能力的Transwell实验（每组3孔）。(D)小鼠实验示意图（由Figdraw生成）。瘤内注射每3天进行一次，具体剂量为：PBS（对照）、长双歧杆菌（1×10⁸ CFU），以及低（1×10⁷ CFU）、中（1×10⁸ CFU）、高（1×10⁹ CFU）剂量的Ralstonia sp.。(E)皮下移植瘤的代表性图像（每组6只）。(F)动物实验过程中肿瘤体积变化。(G)治疗期间小鼠体重变化（每组6只）。(H)血清ALT、AST、ALP（肝功能）及BUN、CRE（肾功能）水平（每组6只）。(I)小鼠肝、肾、脾及肿瘤组织的H&E染色（每组3只）。数据以均值±标准误表示。统计比较采用非配对双尾Stud法。）
四、它如何做到的？揭秘“代谢-免疫”连环计
Ralstonia是如何实现这些抗癌效果的？深入研究后，科学家发现了其精巧的作用机制：
它的“必杀技”在于调控“甘油磷脂代谢”。
简单来说，Ralstonia通过影响肿瘤细胞周围的脂质代谢环境，间接地重塑了肿瘤内部的免疫微环境。具体表现为：
召唤“正义之师”：在Ralstonia存在的环境中，能杀伤癌细胞的M1型巨噬细胞、记忆性CD8+ T细胞等抗肿瘤免疫细胞的数量明显增加。
改变“土壤”性质：其代谢特征与正常组织更相似，可能创造了一个不利于肿瘤生长的微环境。
也就是说，Ralstonia像一位深谋远虑的“指挥官”，通过调节代谢这个核心环节，成功“唤醒”并“武装”了体内的免疫系统，对肿瘤发起了一场里应外合的精准打击。
（HCC 中代谢变化与免疫浸润的关联分析。(A) 代谢物的 OPLS -DA分析数据（上图： UPLC -MS；下图：GC-MS），VIP值>1的代谢物视为显著。(B) 火山图分析显示模拟组与Ralstonia sp.组间差异表达代谢物（p<0.05且VIP>1）。(C) KEGG 富集分析基于超几何检验（p<0.05）筛选出前20个显著通路。(D) 层级聚类热图揭示代谢变化与免疫浸润的相关性。GC-MS：气相色谱-质谱； HCC ：肝细胞癌； OPLS -DA：正交偏最小二乘判别分析； UPLC -MS：超高效液相色谱-质谱；VIP：投影变量重要性。）
五、未来展望：从诊断到治疗的无限可能
这项研究的发现，为肝癌的诊疗开辟了全新的道路：
新型诊断工具：研究构建的“微生物-代谢物”联合诊断模型，区分肝癌与正常组织的准确率（AUC=0.91）远超传统肿瘤标志物。未来，我们或许能通过检测肿瘤的微生物特征，实现更早期的诊断和更精准的分型。
创新疗法曙光：“瘤内注射活菌”可能成为一种全新的癌症免疫疗法。利用人体内天然存在的、安全的细菌直接对抗肿瘤，无疑为我们提供了一种充满想象力的武器。
六、结语
这项研究彻底改变了我们对肿瘤微环境的认知——微生物不仅是“居民”，更可以是积极的“参与者”和“治疗师”。尽管从实验室走向临床还有很长的路要走，但这项发现无疑点亮了一盏明灯。
未来，我们对抗癌症的武器库中，或许将增添一支由微观生命组成的“奇兵”。
原文信息：
Liqiu Li, Mingxuan Wang, Zhaodi Jiang, Changhua Yi ,Yongxiang Yi .Intratumoral microbial heterogeneity in HCC reveals a potential therapeutic target. JHEP Reports, 2025, 7, 1–16