作者进一步探究恶性细胞中炎症信号的潜在机制，scRNA-seq分析发现KC-CP组中TNFSF13B+巨噬细胞的比例显著上调，空间转录组学数据进一步证实了这一点，功能富集发现KC-CP小鼠中TNFSF13B+巨噬细胞中的TNF信号通路显著上调（图2A~C）；在人PDAC队列中发现，TNFSF13B+巨噬细胞富集的患者表现出更高的胶原沉积，pSTAT3表达也显著升高，且存活水平更低（图2D~H）；并通过类器官培养实验，发现TNFSF13B可以增强类器官增殖，CAFs的胶原表达水平增高（图2I~J）。

作者通过构建小鼠胰腺组织和人类PDAC组织的类器官研究发现，CP类器官表现出STAT3磷酸化水平增加、STAT3调控基因表达升高、增殖能力增强，并且对共培养的CAFs具有更强的激活作用，转录组学分析发现，CP类器官表现出显著的ECM样和炎症样改变，且Hippo通路的关键基因CTGF和PAI-1的表达也显著上调（图2I~M）；scRNA-seq进一步显示，Hippo通路在Malignant cell 1中富集，该簇与高恶性程度和高ECM得分相关（图2N）。

代谢组学分析显示，CP类器官中甲羟戊酸代谢的关键分支的活性增加，甲羟戊酸通路的关键代谢物（胆固醇和GGPP）在CP类器官中显著升高（图3A~B）。作者提出并通过湿实验来验证科学假说，即失调的甲羟戊酸代谢通过GGPP和胆固醇合成激活YAP/TAZ，促进PAI-1和CTGF的表达和分泌，并促进CAF激活和基质沉积（图3C~H）。为进一步研究甲羟戊酸代谢对PDAC基质沉积和肿瘤进展的影响，作者用HMGCR抑制剂辛伐他汀处理KC-CP小鼠和人类CP类器官发现，在KC-CP小鼠中，辛伐他汀降低了YAP/TAZ表达，抑制了基质沉积，并减少了肿瘤面积和分级（图3I~K）；并在更具侵袭性的自发性PDAC小鼠模型（KPC小鼠）进行验证，发现HMGCR表达升高的PDAC中，胶原水平显著升高（图3L~P）。这些结果突显了HMGCR介导的甲羟戊酸代谢在促进PDAC基质沉积和恶性进展中的作用。

为了进一步探究炎症是否通过去泛素化HMGCR促进甲羟戊酸代谢和YAP/TAZ信号，作者进行了HMGCR的免疫沉淀质谱分析发现，USP20是对照和CP类器官之间的差异表达基因唯一的去泛素化酶，USP20水平在CP类器官和KC-CP小鼠的胰腺组织中显著升高（图4A~E），Co-免疫沉淀和MST实验表明，USP20与HMGCR直接相互作用（图4F~G），泛素化实验和环己酰亚胺追踪实验显示，USP20抑制K48连接的多泛素化介导的HMGCR降解（图4H~I）；人类PDAC样本显示，USP20和HMGCR蛋白质水平之间存在正相关（图4J）；HMGCR敲除减弱了USP20缺失对YAP/TAZ信号的影响（图4K），证实了HMGCR在该轴中的核心地位。通过转录因子数据库预测，发现STAT3是USP20的潜在转录因子，并通过湿实验进行验证（图4L~O）；在USP20缺陷类器官中，STAT3敲低不会降低HMGCR水平或抑制YAP/TAZ通路（图4P），这表明STAT3对HMGCR和YAP/TAZ的影响依赖于USP20。

为评估USP20在PDAC进展中的作用，我们分析了临床样本中USP20的表达及其与预后的关系。结果显示，与邻近正常组织相比，PDAC肿瘤组织中USP20水平显著更高，且USP20高表达与不良存活结果相关（图5A~C）。此外，USP20表达升高的PDAC组织中，胶原水平显著更高（图5D）。USP20缺失显著抑制了CP类器官的增殖，破坏了YAP/TAZ信号，下调了CTGF和PAI-1的表达和分泌，并抑制了CAF激活（图5E~G）。此外，动物实验进一步表明，Usp20敲低增强了PD-1和/或CTLA-4抗体在KPC来源的同种异体移植小鼠中的治疗效果，并减少了肿瘤组织中的基质沉积和CD8+T细胞浸润（图5H~K）。这些结果表明，USP20是介导PDAC恶性进展和损害ICIs疗效的关键靶点。

作者使用虚拟分子对接和MST实验测试了GSK2643943A其对USP20的亲和力，证实了两者之间的强相互作用（图6A~B）。泛素化实验表明，GSK2643943A抑制USP20对HMGCR的去泛素化活性（图6C）。用GSK2643943A处理可降低HMGCR水平，抑制YAP/TAZ通路，下调PAI-1和CTGF的表达，从而减少CAF激活并抑制CP类器官生长（图6D~G）。在KC-CP小鼠中，GSK2643943A减少了基质沉积，降低了肿瘤面积和分级，并抑制了肿瘤进展（图6H~K）。在KPC模型中，GSK2643943A显著抑制了基质沉积、PD-L1表达，上调了CD8+T细胞浸润，并增强了抗PD-1和抗CTLA-4抗体的疗效，并且GSK2643943A与抗PD-1和抗CTLA-4抗体联合使用可导致肿瘤显著消退（图6L~N）。

鉴于GSK2643943A与抗PD-1/CTLA-4联合使用具有强效治疗效果，作者使用KPC小鼠和来自3名患者的患者来源异种移植（PDX）模型，评估了这种联合治疗在PDAC中的长期疗效。在KPC模型中，GSK2643943A与抗PD-1和抗CTLA-4联合使用显著延长了KPC小鼠的存活时间（图7A~B）。为评估GSK2643943A与卡度尼利单抗联合使用的疗效，作者通过输注PBMCs重建了PDX小鼠的免疫系统，并进行了药物干预（图7C）。结果显示，在PDX-1、PDX-2和PDX-3中，GSK2643943A抑制了基质沉积和肿瘤生长（图7D-F），且其与卡度尼利单抗联合使用显著增强了治疗效果并延长了总生存期（图7G~J）。